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求助帖,关于pod活性测定,求大神指教,在下拜谢!

面包 发表于 2016-5-23 23:36  
查看: 190007|回复: 18|显示全部楼层 |阅读模式
本人在做毕业设计,课题为微波处理对跨荞麦种子萌发及酶活性影响。现阶段用愈创木酚法测定过氧化物酶(POD)出现了问题,希望各位指教一下。    首先简单的介绍一下我的处理过程:取0.3克荞麦种子,用含有0.1mmol/lEDTA,4%PVP的PH7.8,0.05mol/l磷酸缓冲溶液(PBS),配以适量石英砂研磨,后经10000r/min,离心15分钟,的酶初提液。
    测定过程:
4ml反应液(PH6.0,0.05mmol/lPBS,酶液1 ml,0.05mol/l愈创木酚) + 2%H2O2 1ml   混匀后立即于比色皿,测470nm处吸光度,每三十秒记录一次,记录4min,以缓冲溶液代替酶液作对照,以每分钟A470nm吸光度变化0.01为一个酶活单位。
    疑问:但我测定4min内,每个样品吸光度变化不超过0.003,请问何处存在问题?如何改进为好?在下拜谢!!!
求助帖,关于pod活性测定,求大神指教,在下拜谢!
jiangzehua 发表于 2016-5-26 09:55   显示全部楼层
在提取时可以减少提取液,测酶活性时增加酶液体积。可以参考论文介绍的方法“我国大豆种皮过氧化物酶的酶活性及热稳定性研究”
 楼主| 面包 发表于 2016-5-26 11:10   显示全部楼层
jiangzehua 发表于 2016-5-26 09:55
在提取时可以减少提取液,测酶活性时增加酶液体积。可以参考论文介绍的方法“我国大豆种皮过氧化物酶的酶活 ...

多谢多谢
嘟嘟嘟 发表于 2016-9-29 02:20   显示全部楼层
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熙娅2014 发表于 2016-9-29 10:11   显示全部楼层
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daluhaha 发表于 2016-9-29 10:22   显示全部楼层
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1315194166 发表于 2016-9-29 10:39   显示全部楼层
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doudou 发表于 2016-9-29 11:43   显示全部楼层
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xiaotangling晓木虫个人认证 发表于 2016-9-29 14:24   显示全部楼层
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昆吾慕南 发表于 2016-9-29 16:56   显示全部楼层
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Captain.TT 发表于 2016-9-29 17:03   显示全部楼层
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昆吾慕南 发表于 2016-9-29 22:00   显示全部楼层
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cludyh 发表于 2016-9-30 03:42   显示全部楼层
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男人、必自强 发表于 2016-9-30 05:21   显示全部楼层
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男人、必自强 发表于 2016-9-30 06:09   显示全部楼层
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AE筱溪 发表于 2016-9-30 07:53   显示全部楼层
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Edison_yu 发表于 2016-9-30 07:53   显示全部楼层
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小小柳叶 发表于 2016-9-30 11:48   显示全部楼层
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你好岁月 发表于 2016-9-30 12:20   显示全部楼层
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