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基本信息 主题:NMT揭示以斑马鱼为材料的壳聚糖毒理机制 期刊:Carbohydrate Polymers 研究使用平台:NMT毒理创新科研平台 标题:Characterizationand toxicology evaluation of low molecular weight chitosan on zebrafish 作者:台北医学大学 Chia-Hsiung Cheng、Chih-Ming Chou
检测指标 Na+
检测样品 斑马鱼幼鱼上皮细胞 离子流实验处理方法
斑马鱼幼体被浸泡在10μg/mL低分子壳聚糖(LMWCS)和10μg/mL LMWCS+ 10 mM Na2HPO4中5分钟后检测。
Na+流结果
采用非损伤微测技术对斑马鱼幼体上皮细胞释放的Na+进行实时检测。用10μg/mL的LMWCS孵育后,3只斑马鱼幼体的上皮细胞迅速释放出Na+。用10 mM Na2HPO4中和可显著逆转Na+的流出。总的来说,这些数据表明LMWCS破坏了斑马鱼幼体的上皮细胞膜功能。
其他实验结果
LMWCS对斑马鱼幼鱼具有一定的毒性,PBS和Na2HPO4缓冲液均能有效地中和这种毒性 LMWCS导致斑马鱼幼鱼的上皮细胞严重受损,最终导致其死亡 在斑马鱼幼鱼死亡前,可能引起卵黄上皮损伤和行为异常 LMWCS对斑马鱼肝脏细胞膜损伤具有细胞毒性 LMWCS破坏了成年斑马鱼的组织,鳃瓣损伤是成年斑马鱼死亡的主要原因 LMWCS在河水中也可导致斑马鱼死亡
结论
LMWCS可迅速导致斑马鱼幼鱼和成鱼在水中死亡,即使在正常的河水中也是如此。LMWCS靶向并破坏上皮细胞膜和鳃瓣,诱导斑马鱼幼鱼和成鱼死亡。此外,LMWCS对斑马鱼肝细胞、斑马鱼幼鱼和成鱼的毒性可以用Na2HPO4缓冲液中和。即使在斑马鱼模型中也发现了LMWCS的毒性,但由于LMWCS的水不溶性和易被其它负离子中和,其毒性只存在于pH<7的环境中这些结果提供了对LMWCS特性的新理解。
离子流实验使用的测试液 0.5 NaCl,0.2 CaSO4,0.2 MgSO4,0.16 KH2PO4,0.16 K2HPO4,pH 7.0(单位mM)
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